大孔樹(shù)脂層析柱的正確使用方法分享
更新時(shí)間：2023-05-16瀏覽：1547次
大孔樹(shù)脂層析柱是一種常用于生物分離、純化和制備的工具。與其他基質(zhì)不同，大孔樹(shù)脂的顆粒尺寸比較大，可以通過(guò)大大地增加流速而不影響處理能力，這將減少操作時(shí)間并促進(jìn)樣品的快速制備。以下是大孔樹(shù)脂層析柱的使用方法。
1、預(yù)處理
在實(shí)驗(yàn)前，必須進(jìn)行預(yù)處理。通常情況下，需要先用洗滌緩沖液清洗封口，然后用少量緩沖液平衡層析柱。應(yīng)準(zhǔn)備兩份平衡液，一份用于前體層析柱，一份用于色譜層析柱。這有助于避免樣品中可能存在的污染物掛載在樹(shù)脂表面上，降低層析分離效果。
2、樣品制備
樣品制備對(duì)其使用至關(guān)重要。通常情況下，需要首先對(duì)樣品升級(jí)純化，以提高分離精度。然后通過(guò)雜質(zhì)預(yù)清除，去除樣品中的雜質(zhì)。此外，還要對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?/div>
3、進(jìn)料條件
將平衡完畢的產(chǎn)品與進(jìn)樣裝置連接，準(zhǔn)備進(jìn)料。在進(jìn)料之前，應(yīng)確保進(jìn)料裝置中無(wú)氣泡，并且樣品注入速度不得過(guò)快。過(guò)快的注入速度會(huì)增加其內(nèi)部的混合程度，從而影響分離效果。此外，需要根據(jù)尺寸和流量計(jì)算邁階數(shù)和沖洗時(shí)間等參數(shù)。
4、層析分離
將經(jīng)過(guò)預(yù)處理和制備的樣品緩慢地注入柱中，按照設(shè)定條件實(shí)現(xiàn)各組分之間的分離。通常情況下，需要在分離過(guò)程中監(jiān)測(cè)各組分的含量和純度，以便及時(shí)調(diào)整進(jìn)料條件和流程參數(shù)。
5、洗脫吸收
當(dāng)某一組分被分離出來(lái)后，就可以通過(guò)洗脫吸收來(lái)收集其單獨(dú)存在的純品。
通過(guò)正確使用大孔樹(shù)脂層析柱并遵循適當(dāng)?shù)木S護(hù)步驟，可以獲得高質(zhì)量的分離，提高樣品制備效率，滿足分離純化要求。
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